Маз 555142: 555142, тормозная система ее неисправность, технические характеристики, отзывы, двигатель Д260

555142, тормозная система ее неисправность, технические характеристики, отзывы, двигатель Д260

Автор Petroviches На чтение 4 мин.

Содержание

1. Устройство и характеристики
2. Двигатель
3. Обслуживание и ремонт
4. Тормозная система и ее неисправности
5. Отзывы и цены

МАЗ сельхозник — маневренный грузовой автомобиль, который более 30 лет производится на Минском автозаводе. Самосвал отличается высокой проходимостью, грузоподъемностью и востребован во многих отраслях.

Устройство и характеристики

Самосвал МАЗ-555142 — компактный, может легко перемещаться в городе. Грузовик предназначен для транспортировки сыпучих материалов и других грузов. Техника применяется в сельском хозяйстве, в промышленности, дорожном и коммунальном строительстве. Стандартная модель автомобиля оснащена кузовом с разгрузкой назад.

Движение кузова имеет дистанционное управление. В кабине водителя имеется 2 сидения, есть пространство для хранения вещей. Кресло имеет рессоры и может передвигаться вперед и назад. Есть регулировка рулевой колонки.

Боковые зеркала имеют электроподогрев. Недостатком является отсутствие хорошей амортизации в месте крепления кабины. Чтобы получить доступ к системам грузовика, кабину можно откидывать вперед при помощи гидропривода. Движение кабины осуществляется при открытой решетке радиатора. Дно автомобиля обогревается, что позволяет использовать грузовик в зимнее время.

Технические характеристики:

1. Габариты 5990х7850х2500 мм.
2. Мощность 180 л.с.
3. Скорость 83 км/ч.
4. Вес 7580 кг.
5. Грузоподъемность 8500 кг.
6. Объем кузова 5,4 м³.
7. Размеры кузова 3800х2269х630 мм.
8. Колесная формула 4х2.
9. Радиус разворота 7,9 м.

Привод подъема кузова находится под платформой. Механизм опрокидывания — гидравлический с пневмоуправлением. Установлен телескопический гидроцилиндр. Это позволяет развивать высокие показатели грузоподъемности при небольшой массе. Для повышения безопасности в управляющем клапане гидроцилиндра имеется предохранитель.

При этом при перегрузке более 1,5 т не произойдет полного подъема платформы. Цапфы заднего борта управляются пневмоцилиндром. Грузовик оснащен двухдисковым сцеплением. Составляющие данной системы подвержены износу вследствие больших перегрузок и требуют регулярного техосмотра.

Двигатель

На грузовик установлен дизельный двигатель Д260.1-440. Это четырехтактный шестицилиндровый ДВС с вертикальным расположением цилиндров. Мотор оснащен непосредственным впрыском топлива и системой турбонаддува. Такой мотор можно эксплуатировать при температуре воздуха от -45 ºC до +40 ºC.

Технические характеристики двигателя:

1. Наименование Д260.1-440.
2. Тип четырехтактный.
3. Объем двигателя 7,12 л.
4. Диаметр цилиндра 110 мм.
5. Ход поршня 125 мм.
6. Степень сжатия 15.
7. Удельный расход топлива 220 г/кВтч.
8. Мощность 114 кВт.
9. Частота вращения 2100 об/мин.
10. Крутящий момент 622 Нм.
11. Вес 700 кг.

Обслуживание и ремонт

Обслуживание и ремонт грузового автомобиля осуществляется в сервисных центрах. Станции техобслуживания оснащены современным диагностическим и ремонтным оборудованием, что позволяет быстро выполнить ремонт любой сложности. Специалисты выполняют ремонт любых узлов, начиная от двигателя и заканчивая кузовом.

Имеется возможность вызвать работников сервисного центра на место расположения техники. Выполняется ремонт таких узлов: мотора, трансмиссии, КПП, электрооборудования, подвески, рулевого управления, тормозной системы, проводятся все виды диагностики и обслуживания.

Тормозная система и ее неисправности

Возможные поломки тормозной системы:

• недостаточная эффективность торможения;
• неравномерность торможения правых и левых колес;
• отсутствие растормаживания рабочих или стояночных тормозов;
• увеличенный ход рукоятки стояночного тормоза.

Если загорелась контрольная лампа, нужно проверить уровень тормозной жидкости в бачке. Если подтекание тормозной жидкости не обнаружено, проводят дальнейшую диагностику.

Слабое торможение может быть вызвано большим зазором между барабаном и колодками или малым давлением воздуха в системе, попаданием воды в тормозной механизм или замасливанием тормозных накладок.

Если при однократном нажатии на педаль происходит торможение, это говорит об исправности гидропривода и отсутствии в нем воздуха. Если для торможения необходимо много раз нажимать на педаль, это говорит о неисправности тормозной системы.

Причины неисправности:

• износ барабанов, накладок;
• низкое давление воздуха в пневмосистеме;
• попадание воздуха в гидросистему.

Устранение неисправностей: негерметичность соединений гидропривода устраняют подтягиванием гаек или заменой поврежденных деталей.

Отзывы и цены

Сергей Данилович, фермер

В нашем хозяйстве используется самосвал МАЗ-5551 для перевозки сельскохозяйственных грузов, урожая зерновых, кормов, удобрений, готовой продукции. Цена аренды — 8000 руб за смену. Машина обладает отличными характеристиками, вместительная, позволяет транспортировать большое количество грузов. Техника обладает высокой скоростью и справляется со всеми работами, которые существуют в хозяйстве.

Николай, водитель грузовика

Работаю водителем автомобиля МАЗ-5551. Машина отличается хорошей сборкой, проста в обслуживании и ремонте. При любой неисправности замену деталей осуществляют быстро в сервисном центре. Машина оснащена удобной комфортабельной кабиной и современным оборудованием.

Читайте также:

Оцените автора

МАЗ 5551 – История, модификации, полный обзор самосвала МАЗ-5551

Вы здесь:  
1. Главная
2. Блог
3. МАЗ 5551 – История, модификации, полный обзор самосвала МАЗ-5551

Эта самая массовая модель маневренных самосвалов усердно трудится на всех строительных площадках страны. Самосвал МАЗ- 5551 рассчитан для «короткого плеча». Он незаменим в городском строительстве.

Общий look МАЗ 5551

На фото, представленных здесь, продемонстрирована версия грузовика, получившая кардинально измененную кабину. Ее абрисы утратили былую округлость, уступив место четким граням. Прежнее раздвоенное лобовое стекло грузовика уступило место большому гнутому панорамному триплексу. Крыша кабины украсилась новым спойлером, уменьшающим расход топлива. Креативным изменениям подвергся дизайн фар.

На протяжении многих лет технические характеристики автомобилей непрерывно дорабатывалась. Фото свидетельствуют: постепенно с конвейера исчезла капотная компоновка с двухтактными агрегатами, а ее место на конвейере заняла собственный проект МАЗ-500.

С того времени из ворот предприятия выкатилось множество модификаций данного прототипа. На видео выделяется самосвал МАЗ-503, предшественник модели МАЗ-5537. Проект лег в основу модификации МАЗ-5551.

Модельная линия

Разработка оказалась настолько удачной, что на ее основе были создан целый ряд модификаций:

• Маз 5550. Представляет собой очередную версию этих маневренных грузовиков. Маз 5550 снабжен двигателем (435л.с.), который работает в тандеме с 6-ти ступенчатой коробкой скоростей. В качестве горючего Маз 5550 потребляет топливо, соответствующее экологическому стандарту Евро-4;
• Маз 555102. На грузовике установлен двигатель мощностью в 230 «лошадей». Благодаря более внушительному агрегату, маз 555102 имеет хорошую разгонную скорость.

Говоря о технических тонкостях, следует отметить, что увеличение мощности мотора, установленного на маз 555102, стало возможным с применением турбонаддува. Осуществляется промежуточное охлаждение воздуха.

Преимущества маз 555102 хорошо проявляют себя в режиме городского движения. Даже при неблагоприятных температурных условиях маз 555102 уверенно передвигается по улицам на больших скоростях. К тому же, маз 555102 расходует топлива меньше;

• Маз 555142. Данная модификация отличается от прототипа тем, что маз 555142 работает в тандеме с прицепом. Грузоподъемность такого автопоезда существенно выше;
• Маз 5551а2. Автопоезд позиционирован как зерновоз. Маз 5551а2 способен разгружаться налево, направо и назад. Иными словами, маз 5551а2 состоит из основного самосвала и дополнительного прицепа. Обе грузовых емкости снабжены более высокими бортами. Комплектация маз 5551а2 дополнена тентом и задним съемным пологом;
• Маз 5550в2. Самосвал способен перевозить сыпучие грузы, масса которых не превышает 10 тонн. Маз 5550в2 привлекает компактными габаритами и отличной маневренностью. Он хорошо работает на ограниченных территориях, экономным топливным расходом. Укрепленная подвеска адаптирована к бездорожью.

Об интерьере, экстерьере и эргономике МАЗ 5551

Описание кабины минского «долгожителя» следует начать с того, что она существенно просторнее КамАЗовского салона. Увеличению комфортности способствует выигрышное местонахождение ступенек и поручней. Благодаря этому, водителю легко забирается на водительское место.

Невзирая на то, что рулевые колонки обладают двухплоскостной регулировкой, а водительское кресло передвигается по салазкам, шофер пребывает в неудобном положении. И хотя обзор остается хорошим, налицо повышенная утомляемость водителя, что особенно опасно в условиях дальних маршрутов.

Из фото видно, что габариты рулевого колеса излишне велики. Для того, чтобы совершить поворот, водитель с маленьким ростом вынужден совершать регулярные наклоны вперед.

Самосвал оснащен удобной и достаточно информативной приборной панелью. Однако, здесь есть свое «но»: световая индикация недостаточно яркая, посему в дневные часы приборы просматриваются плохо.

И все же, удачных конструктивных решений в кабине самосвала МАЗ-5551 значительно больше, нежели промахов (о чем свидетельствуют позитивные отзывы). Удачной является компоновка блока, в котором размещены предохранители и реле. Располагается он позади приборной панели, ближе к пассажирскому креслу. Поверх него вмонтирован легко открывающийся лючок.

Изменилась и конструкция стояночного тормоза. Если раньше данные грузовики снабжались барабанными ручниками, то в нынешней компоновке МАЗ-5551 (а, также, маз-555102) присутствуют тормозные камеры и пружинные аккумуляторы.

Уровень комфортности внутреннего пространства кабины обеспечивается множеством дополнительных опций, представленных на видео:

• вентиляционным люком не крыше;
• осветительным плафоном салона;
• эффективной отопительной системой.

МАЗовская кабина снабжена единственным пассажирским креслом. Пространство между ним и водительским местом заполнено полкой, в которой можно хранить документы, бутылки и другую мелочь. Внушительные блоки наружных зеркал заднего вида обеспечивают прекрасную видимость.

Помимо регулировочных систем, кресло водителя имеет подрессоривающие узлы. Настоящего комфорта кабине МАЗа не достает, ибо крепится она к раме напрямую, без амортизаторов. О пассажирском сидении вообще говорить не приходится: в нем нет регулировок, оно жестко вмонтировано в пол салона.

На видео показан гидропривод, который поднимает кабину, открывая для обозрения силовой агрегат. Такой узел более надежен, в сравнении с пружинной системой, способной при поломке замка откидываться в самый неподходящий момент. Чтобы теперь поднять кабину, необходимо открыть радиаторную решетку и добраться до «монтажки», которая приводит механизм в действие.

Техническая часть: ходовые свойства самосвала МАЗ 5551

Для определения технических качеств самосвала МАЗ-5551 был совершен пробег протяженностью порядка 900 километров. По результатам тестирования возникли некоторые замечания.

Коробка скоростей, установленная на грузовике, обладает неплохой избирательностью, однако переключение ступеней происходит с заметным усилием. Для осуществления перехода передач «вниз» или «вверх» применяется двойной выжим сцепления (вкупе с перегазовкой). Весь цикл осуществляется точно и мягко.

Будучи полностью загруженным (10 тонн), самосвал МАЗ-5551 очень трудно трогается с места на первой передаче. Эта скорость довольно коротка, а разгонная динамика чрезвычайно мала.

Если же грузовик находится на ровной трассе, то даже полная масса самосвала в 17 тонн не мешает ему спокойно начинать движение даже со второй передачи.

При полной нагрузке грузовик развивает крейсерскую скорость порядка 90 км/час. Однако, даже пятая передача удерживает скорость грузовика в пределах 40 км/час. При этом, расход топлива не превышает указанных в руководстве пределов. Руль машины оснащен бесперебойным гидроусилителем, благодаря чему автомобиль передвигается довольно юрко.

Модель восхищает отличной маневренностью. Фото доказывают: самосвал способен совершить полный разворот даже на самых узких дорогах. Позади заднего моста установлен стабилизатор, обеспечивающий поперечную устойчивость. Благодаря этому, тяжелогруженая машина уверенно преодолевает повороты.

На грузовике функционируют блоки пневматических тормозов. Эффективная система обладает единственным недостатком: уж слишком долго закачивается воздух. Это объясняется недостаточно мощным компрессором.

Подобные недостатки вполне объяснимы для недорогих моделей. Ибо стоимость самосвала МАЗ-5551(как и маз-555102) значительно меньше цен, по которым реализуются аналогичные иномарки, на борту которых имеются всевозможные дополнительные узлы и опции (да и запчасти отыскать легче).

Резюмируя все сказанное, можно отметить следующее. Самосвал Маз 5551 стал на конвейер более четверти столетия тому назад. Канула в Лету страна, в которой начинался выпуск этих машин. Несмотря на это, проект выжил в непростые времена и благополучно дожил до наших дней (даже подержанные экземпляры работают достойно). Тому способствовал гибкий менеджмент и эффективная работа коллектива Минского автомобильного завода, детищем которого является МАЗ-5551.

Наша компания предлагает Вам услуги аренды самосвалов с водителями в Краснодаре и Краснодарском крае, Ростове и Республике Крым по низким ценам и с гарантией.

Звоните сейчас и получите скидку +7 (988) 318-84-49.

 

• Есть ли достоинства у китайских самосвалов?
• Виды строительного песка. Как выбрать лучший песок?

Наша техника в аренду

Калькулятор
расчета стоимости

Задать вопрос
Мы с радостью поможем!

Обратный звонок
Позвоним Вам в ближайшее время!

Самое интересное

• Технология укладки асфальта по ГОСТу – способы, этапы и используемая техника
• Песчано-гравийные смеси (ПГС) – цены, виды, фракции ПГС, ГОСТы
• Песчаные карьеры Московской области – карта карьеров, свойства песка и список карьеров Подмосковья
• org/Article»> Добыча песка в России – где и как добывают песок?!
• Как правильно разрезать или разбить фундаментный блок?
• Дорожная техника – обзор современной дорожно-строительной техники
• Техника для земляных работ – обзор спецтехники, аренда, виды работ
• Добыча щебня в России – где и как добывают щебень?!

Horizon, Колорадо-Спрингс, Колорадо Недвижимость и дома в аренду

• Горизонт
  Местоположение

  Ничего не найдено

• Любая цена
• Любые кровати
• Любые бани
• • Продается
  • Аренда
  Квадратный фут
  до
  Квадратный фут
  Объем партии
  Нет Мин. 2000 кв. футов 4000 кв. футов 6000 кв. футов 8000 кв. футов 0,25 акров 0,5 акров 1 акр 2 акра 3 акра 4 акра 5 акров 10 акров 40 акров
  до
  Объем партии
  Нет Макс. 2000 кв. футов 4000 кв. футов 6000 кв. футов 8000 кв. футов 0,25 акров 0,5 акров 1 акр 2 акра 3 акра 4 акра 5 акров 10 акров 40 акров 100 акров
  Год постройки
  до
  Год постройки
  Ключевые слова

  Тип недвижимости

  • Одна семья
  • Кондо
  • Таунхаус Таунхаус

  • Мобильный дом Мобильный дом

  • Многосемейный Многосемейный

  • Аренда Аренда

  Статус листинга

  • Аренда Аренда

  • В ожидании В ожидании

  Новые объявления на сайте
  Новые объявления на сайте
  Дни открытых дверей
  Дни открытых дверей
  Роскошь
  Роскошь
  Виртуальный тур
  Виртуальный тур
  3D тур
  3D тур
  Цена снижена
  Цена снижена
  Должны быть фотографии
  Должны быть фотографии

  Внесено в список

  Все объявления
  Все объявления
  Агенты
  Агенты
  Команды
  Команды
  Офисы
  Офисы

  Полученные результаты

Гибрид

• 0 результатов

По вашему запросу не найдено ни одного дома. Расширьте параметры поиска или рассмотрите сохранить этот поиск для получения оповещений, когда станут доступны результаты.

Ближайшие списки

Фаворит

1435 CRIPPEN CT, Колорадо-Спрингс, Колорадо 80916

300 000 долларов

Листинг MV Realty of Colorado LLC – Sue Ladd

Избранное

4585 JET WING CIR W, Colorado Springs, CO 80916

9 0153 429 000 долларов

Листинг по Platinum Group — Sheri L Bennett

Любимый

1580 Ride LN, Colorado Springs, CO 80916

408 000 долларов

Листинг Fathom Realty Colorado LLC – Марисса Робсон

Избранное

1580 RIDE LN, Colorado Springs, CO 80916

408 000 долларов

Листинг Fathom Realty Colorado LLC – 3708855

Избранное

1492 JET WING CIR, Colorado Springs, CO 80916

307 000 долларов США

Листинг RE/MAX Properties Inc – Robert P Malone CRS GRI

Фаворит

4940 Бичвейл, штат Колорадо-Спрингс, Колорадо 80916

439 000 долларов

Листинг Red Bow Realty – Delia Hammond MRP

1. РЕ/МАКС
2. СО Недвижимость
3. Горизонт Недвижимость

Популярные города и индексы в Колорадо

Города

• Дома в Денвере на продажу
• Продажа домов в Колорадо-Спрингс
• Продажа домов в Авроре
• Продажа домов в Гранд-Джанкшн
• Пуэбло Дома на продажу
• Дома в Форт-Коллинзе на продажу
• Аспен Дома на продажу
• Дома в Литтлтоне на продажу
• Дома на продажу в Пуэбло-Уэст
• Дома в Валуне на продажу

Молнии

• 81611 Дома на продажу
• 81007 Дома на продажу
• 81252 Дома на продажу
• 80134 Дома на продажу
• 81147 Дома на продажу
• 80550 Дома на продажу
• 80504 Дома на продажу
• 81301 Дома на продажу
• 80449 Дома на продажу
• 80424 Дома на продажу

---

Информация МЛС

Информация о листинге предоставлена

Каждый офис находится в независимом владении и управлении.

Контент, относящийся к продаже недвижимости на этом веб-сайте, частично взят из программы обмена данными в Интернете (IDX) компании METROLIST, INC., DBA RECOLORADO®. Списки недвижимости, принадлежащие брокерам, не отмеченным логотипом IDX. Эта информация предоставляется потребителям для личного некоммерческого использования и не может использоваться для каких-либо других целей. Вся информация может быть изменена и должна быть проверена независимо. Данная публикация предназначена для предоставления информации по рассматриваемому вопросу. Это отображается с пониманием того, что издатель и авторы не занимаются оказанием недвижимости, юридических, бухгалтерских, налоговых или других профессиональных услуг и что издатель и авторы не предлагают такие консультации в этой публикации. Если требуется помощь в сфере недвижимости, юридическая или иная экспертная помощь, следует обратиться к услугам компетентного, профессионального человека. Информация, содержащаяся в данной публикации, может быть изменена без предварительного уведомления. METROLIST, INC., DBA RECOLORADO НЕ ДАЕТ НИКАКИХ ГАРАНТИЙ В ОТНОШЕНИИ ЭТОГО МАТЕРИАЛА, ВКЛЮЧАЯ, ПОМИМО ПРОЧЕГО, ПОДРАЗУМЕВАЕМЫЕ ГАРАНТИИ КОММЕРЧЕСКОЙ ПРИГОДНОСТИ И ПРИГОДНОСТИ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕННОЙ ЦЕЛИ. METROLIST, INC., DBA RECOLORADO НЕ НЕСЕТ ОТВЕТСТВЕННОСТИ ЗА ОШИБКИ, СОДЕРЖАЩИЕСЯ ЗДЕСЬ, ИЛИ ЗА ЛЮБОЙ УЩЕРБ, СВЯЗАННЫЙ С ОБОРУДОВАНИЕМ, ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ИЛИ ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ЭТОГО МАТЕРИАЛА. Вся недвижимость, рекламируемая здесь, подпадает под действие Федерального закона о справедливом жилищном обеспечении и Закона Колорадо о справедливом жилищном обеспечении, которые объявляют незаконными создание или публикацию любой рекламы, указывающей на какие-либо предпочтения, ограничения или дискриминацию по признаку расы, цвета кожи, религии, пола, инвалидность, семейное положение или национальное происхождение. METROLIST, INC., DBA RECOLORADO не будет сознательно принимать любую рекламу недвижимости, которая нарушает закон. Настоящим сообщается всем лицам, что все рекламируемые жилые помещения доступны на основе равных возможностей. Copyright © 2023 METROLIST, INC., DBA RECOLORADO®. Все права защищены 6455 С. Йосемити-стрит, офис 300 Гринвуд-Виллидж, Колорадо 80111 США ВСЕ ПРАВА ЗАЩИЩЕНЫ ПО ВСЕМУ МИРУ. Никакая часть этой публикации не может быть воспроизведена, адаптирована, переведена, сохранена в поисковой системе или передана в любой форме и любыми средствами, электронными, механическими, фотокопированием, записью или иным образом, без предварительного письменного разрешения издателя. Содержащаяся здесь информация, включая, помимо прочего, весь текст, фотографии, цифровые изображения, виртуальные туры, может быть использована и проверена для защиты и отслеживания. Информация считается надежной, но не гарантируется.

Информация о недвижимости и соответствующий контент, отображаемый на этом сайте, предоставляется исключительно для личного, некоммерческого использования потребителями и не может использоваться для каких-либо других целей, кроме как для определения потенциальной недвижимости, которую потребители могут заинтересовать в покупке. Корпорация Pikes Peak REALTOR® Services Corp. считает эту информацию и связанный с ней контент надежными, но их точность не гарантируется. Списки недвижимости, принадлежащие другим брокерским фирмам, обозначены подробной информацией о них, такой как название листинговых фирм. Copyright © 2023 Pikes Peak REALTOR® Services Corp. Все права защищены.

Набор для ИФА человеческого IFN-γ

Набор для ELISA человеческого IFN-γ

(РУО)

Эта стандартная кривая предназначена только для демонстрации. Стандартная кривая должна быть проведена с каждым анализом. Типичная стандартная кривая и выход 20 чашек были получены в лаборатории BD Biosciences Pharmingen с использованием рекомендованной процедуры и ручной промывки чашек.

Эта стандартная кривая предназначена только для демонстрации. Стандартная кривая должна быть проведена с каждым анализом. Типичная стандартная кривая и выход 20 чашек были получены в лаборатории BD Biosciences Pharmingen с использованием рекомендованной процедуры и ручной промывки чашек.

Эта стандартная кривая предназначена только для демонстрации. Стандартная кривая должна быть проведена с каждым анализом. Типичная стандартная кривая и выход 20 чашек были получены в лаборатории BD Biosciences Pharmingen с использованием рекомендованной процедуры и ручной промывки чашек.

Набор для ИФА BD Pharmingen™ Human IFN-γ ELISA

Набор для ИФА BD Pharmingen™ Human IFN-γ ELISA

Набор для ИФА человеческого IFN-γ

Любое использование продуктов, кроме разрешенного использования, без явного письменного разрешения Becton, Dickinson and Company строго запрещено.

информация о продукте

Марка: BD OptEIA™

Реактивность: Человек (контроль качества)

Применение: ELISA (рутинно проверенный)

Регуляторный статус: РУО

РИД: AB_2869029

Описание

    Предоставленный материал  

  

    Набор BD OptEIA™ для человеческого гамма-интерферона (IFN-γ) содержит компоненты, необходимые для разработки твердофазных иммуноферментных анализов (ELISA) природного или рекомбинантного человеческого IFN-γ в сыворотке, плазме и клеточной культуре. супернатанты. Предоставляется достаточное количество материалов, чтобы получить примерно 20 планшетов с 96 лунками, если соблюдаются рекомендуемые условия хранения, материалы, подготовка буфера и процедура анализа, как указано в этой упаковке.

  

  

  

    Оптимизация анализа  

  

    Наборы BD OptEIA™ позволяют гибко разрабатывать наборы анализов в соответствии с индивидуальными лабораторными потребностями. Для разработки иммуноанализа с различной чувствительностью и динамическим диапазоном можно варьировать следующие параметры: захват, титры детектирующих антител, время инкубации, температура инкубации, состав разбавителя для анализа, pH буфера, ионная сила, концентрация белка, тип субстрата, метод промывки ( т. е. количество повторений стирки и время замачивания).

  

  

  

    Стандартизация: этот иммуноанализ откалиброван по очищенному рекомбинантному IFN-γ человека, экспрессируемому бакуловирусом, произведенному в BD Biosciences Pharmingen.

  

  

  

    В этом наборе оценивали Первый британский стандарт NIBSC/ВОЗ 82/587 (человеческий IFN-γ, полученный путем индукции фитогемагглютинина). Коэффициент преобразования для материала NIBSC следующий: эквивалентное значение NIBSC (МЕ/мл) = 0,010 x человеческий IFN-γ BD OptEIA™ (пг/мл). Стандарт NIAID #Gxg01-902-535 (рекомбинантный человеческий IFN-γ, экспрессированный в E. coli) оценивали в этом наборе. Коэффициент преобразования для материала NIAID следующий: эквивалентное значение NIAID (МЕ/мл) = 0,021 x значение IFN-γ BD OptEIA™ (пг/мл).

Подготовка и хранение

Храните невскрытые реагенты при температуре 2-8°C. не используйте реагенты после истечения срока годности или при явном помутнении. Перед использованием доведите все реагенты до комнатной температуры (18-25°С). Сразу после использования вернуть в надлежащие условия хранения. Лиофилизированные стандарты стабильны до истечения срока годности. После восстановления сразу же отправьте аликвоты стандартного раствора в полипропиленовые флаконы по 50 мкл на флакон и заморозьте при -80°C на срок до 6 месяцев. При необходимости храните при 2-8°C до 8 часов перед разделением на аликвоты/замораживанием. Не оставляйте восстановленный стандарт при комнатной температуре.

Показать больше Показывай меньше

Рекомендуемые процедуры анализа

    Рекомендуемые буферы, растворы  

  

    Примечание. Не используйте азид натрия в этих препаратах. Азид натрия инактивирует фермент пероксидазу хрена. Рекомендуется набор реагентов BD OptEIA™ Reagent Set B (кат. № 550534), содержащий буфер для покрытия, разбавитель для анализа, реагенты субстрата A и B, стоп-раствор и 20-кратный концентрат промывочного буфера.

  

    1. Буфер для покрытия – 0,1 М карбоната натрия, pH 9,5; 8,40 г NaHCO3, 3,56 г Na2CO3; q.s. до 1,0 л; рН до 9,5. Свежеприготовить или использовать в течение 7 дней после приготовления, хранить при температуре 2-8°C.

  

    2. Разбавитель для анализа – PBS* с 10% FBS#, pH 7,0. Рекомендуется использовать разбавитель для анализа BD Pharmingen™ (кат. № 555213).

  

    *Фосфатно-солевой буфер: 80,0 г NaCl, 11,6 г Na2HPO4, 2,0 г Kh3PO4, 2,0 г KCl, q.s. до 10 л; рН до 7,0.

  

    #Fetal Bovine Serum: Hyclone Cat. Рекомендуется № Ш40088 (термоинактивированный).

  

    Свежеприготовьте или используйте в течение 3 дней после приготовления при температуре 2–8 °C  хранения.

  

    3. Буфер для промывки — PBS* с 0,05% Tween-20. Свежеприготовить или использовать в течение 3 дней после приготовления, хранить при температуре 2-8°C.

  

    4. Раствор субстрата – тетраметилбензидин (ТМБ) и перекись водорода. Рекомендуется использовать набор реагентов субстрата BD Pharmingen™ TMB (кат. № 555214).

  

    5. Стоп-раствор — 1 М h4PO4 или 2 н. d  

  

    1. Рекомендуются 96-луночные планшеты BD Falcon™ ELISA (кат. № 353279).

  

    2. Считыватель микропланшетов, способный измерять оптическую плотность при 450 нм

  

    3. Пипетки Precision 4. Градуированный цилиндр, один литр  

  

    5. Деионизированная или дистиллированная вода  

  

    6. Промывочная бутыль или автоматическая мойка  

  

    7. Журнал регистрации миллиметровая бумага или автоматизированная обработка данных  

  

    8. Пробирки для приготовления стандартных разведений  

  

    9. Лабораторный таймер  

  

    10. Запайщик пластин или парафильм   

   

  

  

    Сбор образцов и обращение с ними. Образцы должны быть прозрачными, негемолизированными и нелипемическими.

  

    Супернатанты клеточных культур: удалите все твердые частицы центрифугированием и немедленно проанализируйте или храните образцы при температуре ≤ -20°C. Избегайте повторяющихся циклов замораживания-оттаивания.

  

    Сыворотка: используйте пробирку для отделения сыворотки и дайте образцам свернуться в течение 30 минут, затем отцентрифугируйте в течение 10 минут при 1000 g. Немедленно удалите сыворотку и проведите анализ или храните образцы при температуре ≤ 20°C. Избегайте повторяющихся циклов замораживания-оттаивания.

  

    Плазма: Соберите плазму, используя цитрат, ЭДТА или гепарин в качестве антикоагулянта. Центрифугировать в течение 10 минут при 1000 x g в течение 30 минут после 

  

    коллекция. Немедленно проанализируйте или храните образцы при температуре < -20°C. Избегайте повторяющихся циклов замораживания-оттаивания.

  

    Приготовление стандартов и обращение с ними  

  

    1. Разведение: после нагревания лиофилизированного стандарта до комнатной температуры осторожно откройте флакон во избежание потери материала. Восстановите лиофилизированный стандарт 1,0 мл деионизированной воды, чтобы получить исходный стандарт. Дайте стандарту уравновеситься в течение не менее 15 минут, прежде чем делать разбавления. Vortex осторожно перемешать.

  

    2. Хранение/обращение с восстановленным стандартом: после восстановления сразу же разведите аликвоты стандартного раствора в полипропиленовых флаконах по 50 мкл на флакон

  

    и заморозьте при -80°C на срок до 6 месяцев. При необходимости перед разделением на аликвоты/замораживанием храните до 8 часов при температуре 2–8 °C. Не оставляйте восстановленный

 

    стандарт при комнатной температуре (КТ).

  

    3. Подготовка стандартов для анализа:  

  

    а. Подготовьте стандарт 300 пг/мл из стандартного запаса. Вортекс для перемешивания. (См. инструкции по разбавлению в инструкции/сертификате анализа.)  

  

    b. Добавьте 300 мкл разбавителя для анализа в 6 пробирок. Пометьте как 150 пг/мл, 75 пг/мл, 37,5 пг/мл, 18,8 пг/мл, 9,4 пг/мл и 4,7 пг/мл.

  

    c. Выполните серийные разведения, добавляя 300 мкл каждого стандарта в следующую пробирку и встряхивая между каждым переносом. Разбавитель для анализа служит

  

    нулевой стандарт (0 пг/мл).

  

  

  

    Подробная процедура анализа  

  

    1. Покройте микролунки 100 мкл Capture Anti тела, разведенного в буфере для покрытия. Информацию о рекомендуемом разведении покрытия антител см. в инструкции/сертификате анализа для конкретной партии. Закройте планшет и инкубируйте в течение ночи при 4°C.

  

    2. Аспирируйте лунки и промойте 3 раза ≥ 300 мкл/лунку промывочного буфера. После последней промывки переверните планшет и промокните впитывающей бумагой, чтобы удалить

  

    остаточный буфер.

  

    3. Блокируйте планшеты с ≥ 200 мкл/лунку разбавителя для анализа. Инкубируйте при комнатной температуре (RT) в течение 1 часа.

  

    4. Аспирируйте/промывайте, как в шаге 2.  

  

    5. Приготовьте разведения стандарта и образца в разбавителе для анализа. См. «Подготовка стандартов и обращение с ними».

  

    6. Внесите по 100 мкл каждого стандарта, образца и контроля в соответствующие лунки. Закройте планшет и инкубируйте в течение 2 часов при комнатной температуре.

  

    7. Аспирируйте/промывайте, как на шаге 2, но всего 5 промывок.

  

    8. Добавьте 100 мкл рабочего детектора (детектирующее антитело + реагент SAv-HRP) в каждую лунку. Закройте планшет и инкубируйте в течение 1 часа при комнатной температуре.

  

    9. Аспирация/промывка, как на шаге 2, но всего 7 промывок. ПРИМЕЧАНИЕ. На этом заключительном этапе промывки замочите лунки в промывочном буфере на время от 30 секунд до 1 минуты  

   

    для каждой промывки.

  

    10. Добавьте по 100 мкл раствора субстрата в каждую лунку. Инкубируйте планшет (без герметика) в течение 30 минут при комнатной температуре в темноте.

  

    11. Добавьте в каждую лунку по 50 мкл стоп-раствора.

  

    12. Измерьте оптическую плотность при 450 нм в течение 30 минут после прекращения реакции. Если доступна коррекция длины волны, вычтите поглощение при 570 нм из поглощения при 450 нм.

  

  

  

    Краткое описание процедуры анализа  

  

    1. Добавьте в каждую лунку по 100 мкл разведенного Capture Ab. Инкубируйте в течение ночи при 4°C.

  

    2. Аспирировать и промыть 3 раза.

  

    3. Блочные планшеты: по 200 мкл разбавителя для анализа в каждую лунку. Инкубировать 1 час при комнатной температуре

  

    4. Аспирировать и промыть 3 раза.

  

    5. Добавьте 100 мкл стандарта или образца в каждую лунку. Инкубируйте 2 часа RT.

  

    6. Аспирировать и промыть 5 раз.

  

    7. Добавьте 100 мкл рабочего детектора (детектирующие антитела + SAv-HRP) в каждую лунку. Инкубировать в течение 1 часа при комнатной температуре

 

    8. Аспирировать и промыть 7 раз (от 30 с до 1 мин)

  

    9. Добавить 100 мкл раствора субстрата в каждую лунку. Инкубируйте 30 мин при комнатной температуре в темноте   

  

    10. Добавьте в каждую лунку по 50 мкл стоп-раствора. Считать при 450 нм в течение 30 мин с λ-коррекцией 570 нм.

  

  

  

    Подсчет результатов  

  

    Рассчитайте среднее значение оптической плотности для каждого набора дубликатов стандартов, контролей и образцов. Вычтите среднее нулевое стандартное поглощение из каждого.

  

    Постройте стандартную кривую на логарифмической миллиметровой бумаге с концентрацией IFN-γ на оси x и поглощением на оси y. Нарисуйте кривую наилучшего соответствия через стандартные точки.

  

    Чтобы определить концентрацию IFN-γ неизвестного вещества, найдите среднее значение поглощения неизвестного вещества по оси Y и проведите горизонтальную линию к стандартной кривой. В точке пересечения проведите вертикальную линию по оси абсцисс и прочтите концентрацию IFN-γ. Если образцы были разведены, умножьте концентрацию IFN-γ на коэффициент разбавления.

  

    Компьютерное сокращение данных также может быть использовано с использованием логарифмического регрессионного анализа.

  

  

  

    Специфичность  

  

    Перекрестная реактивность. Следующие факторы были протестированы в анализе BD OptEIA™. при ≥ 10 нг/мл и перекрестной реактивности выявлено не было.

  

    Рекомбинантный человеческий: IL-1α, IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10 , IL-11, IL-12 (p40), IL-12 (p70), IL-13, IL-15, G-CSF, GM-CSF, CD23, лимфотактин, MIP-1α, MIP-1β, MCP-1 , MCP-2, NT-3, PDGF-AA, SCF, TNF, LT-α (TNF-β) VEGF

  

    Рекомбинантная мышь: IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-9, IL-10, IL-12 (p70), IL-15, IFN-γ, GM-CSF, MCP-1, TCA3, TNF

Рекомбинантная крыса: IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, GM-CSF, IFN-γ, TNF  

   

    Другое: Вирусный IL-10 (1 нг/мл) TNF кролика   

   

   ent с добавлением 200 пг / мл ИФНγ. Никакого влияния на результаты анализа не наблюдалось. Билирубин, гамма-глобулин человека, гемоглобин человека, сывороточный альбумин человека, трансферрин человека, триглицериды, герпарин (300 единиц/мл), цитрат натрия, ЭДТА.

  

  

  

    Ограничения процедуры  

  

    · Образцы, значения абсорбции которых превышают стандартную кривую, следует разбавлять стандартным разбавителем. и повторный анализ.

  

    · Влияние метаболитов лекарств, растворимых рецепторов или других связывающих белков в образцах тщательно не исследовалось. Возможность вмешательства не может быть исключена.

  

    · Наборы BD OptEIA™ предназначены для использования в качестве единого блока. Не смешивайте реагенты из разных партий набора. Не рекомендуется использовать в этом наборе реагенты других производителей.

Показать больше Показывай меньше

Уведомления о продукте

1. Онлайн-обучение методам ELISA BD OptEIA™ Set см. на http://www.bdbiosciences.com/OptEIA/downloads.shtml
2. Образцы, значения абсорбции которых превышают стандартную кривую, должны быть разбавлены стандартным разбавителем и подвергнуты повторному анализу.
3. Влияние метаболитов лекарств, растворимых рецепторов или других связывающих белков в образцах тщательно не исследовалось. Возможность вмешательства не может быть исключена.
4. Наборы BD OptEIA™ предназначены для использования в качестве единого блока. Не смешивайте реагенты из разных партий набора. Не рекомендуется использовать в этом наборе реагенты других производителей.
5. Реагенты, содержащие консерванты, могут быть токсичными при проглатывании, вдыхании или контакте с кожей.
6. Обращайтесь со всеми образцами сыворотки и плазмы в соответствии с рекомендациями NCCLS по предотвращению передачи инфекций, передающихся через кровь.
7. Внимание! Азид натрия дает высокотоксичную азотистоводородную кислоту в кислых условиях. Разбавьте азидные соединения проточной водой перед тем, как выбросить их, чтобы избежать накопления потенциально взрывоопасных отложений в водопроводе.
8. Источником всех сывороточных белков являются скотобойни, проинспектированные Министерством сельского хозяйства США, расположенные в Соединенных Штатах.
9. ProClin является товарным знаком компании Rohm and Haas.

Показать больше Показывай меньше

555142 Версия 1

Компоненты

Описание	Количество/Размер	Номер детали	EntrezGene ID
Очищенное антитело к IFN-γ человека	Н/Д	51-26131Е	3458
Детектирующее антитело Биотин Анти-человеческий IFN-γ	Н/Д	51-26132Е	3458
Лиофилизированный стандарт рекомбинантного человеческого IFN-γ	Н/Д	51-26136Е	3458
Конъюгат стрептавидин-пероксидаза хрена (SAv-HRP)	Н/Д	51-08	н/д

555142 Версия 1

Цитаты и ссылки

Ссылки на разработку (6)

1. Салих Х. Р., Косовский С.Г., Халушка В.Ф. и др. Конститутивная экспрессия функционального лиганда 4-1BB (CD137) на клетках карциномы. J Immunol. 2000 г.; 165(5):2903-2910. (Биология). Просмотр ссылки

2. Салих Х.Р. и др. Конститутивная экспрессия функционального лиганда 4-1 BB (CD 137) на клетках карциномы. Дж Иммунол. 2000 г.; 165 (5): 2903–2910. (Биология).

3. Sester U, Sester M, Hauk M, Kaul H, Köhler H, Girndt M. Активация Т-клеток у пациентов, находящихся на гемодиализе, происходит по схеме Th2, а не Th3. Трансплантация нефролового набора. 2000 г.; 15(8):1217-1223. (Биология). Просмотр ссылки

4. Сестер У. и др. Активация Т-клеток происходит по схеме Th2, а не Th3 у пациентов, находящихся на гемодиализе. Нефрология Диализная трансплантация. 2000 г.; 15:1217–1223. (Биология).

5. Wolfers J, Lozier A, Raposo G, et al. Опухолевые экзосомы являются источником общих антигенов отторжения опухоли для перекрестного примирования ЦТЛ.